文档帮助中心
热稳定无机焦磷酸酶的制备
背景及概述[1]
在生物体内，NTPs/dNTPs参与核酸的生物合成会生成副产物焦磷酸盐，体内存在的焦磷酸盐会在焦磷酸酶的催化作用下分解，减少焦磷酸累积可能造成的负面效应。PCR利用嗜热酶模拟体内核酸复制的体外反应，伴随dNTPs的参入，焦磷酸的累积同样会降低PCR扩增的效率。焦磷酸的积累，会导致反应混合物的pH降低，影响荧光染料的稳定性。
为了去除这些焦磷酸对PCR的抑制，人们在PCR反应中添加无机焦磷酸酶，用以将焦磷酸(PPi)会水解为正磷酸(Pi)。这种反应，会使反应混合液的pH增加，并是的荧光染料变得更稳定。为了适应PCR的高温，这种焦磷酸酶必须能耐受95℃的高温。重组表达了超嗜热古菌(Pyrococcushorikoshii)的PPase基因，这种酶最适温度为88℃，最适pH为10.3，并不适合PCR的使用。重组表达了嗜热栖热菌(Thermusthermophiles)HB27株的PPase基因。由此，基于嗜热栖热菌的PPase基因，构建一种改造的热稳定无机焦磷酸酶，这种酶可....
该文章只显示3分之一，如想阅读到这篇文章的完整内容，请扫描下方二维码，打开我们的万水化工商城小程序，在首页“知识中心”栏目搜索文章标题继续进行阅读。万水化工商城收集100万+篇精细化工知识文章，旨在为您深入的了解行业知识和化工应用技巧。
上一篇：油酸三乙醇胺的应用
下一篇：环保DOP增塑剂使用范围及使用特点
