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苯酚-氯仿-异戊醇混合物的制备方法

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苯酚-氯仿-异戊醇混合物的制备方法


背景及概述[1]

苯酚-氯仿-异戊醇混合物常用作分析提取液用于提取DNA、多糖等。

制备[1-4]

苯酚-氯仿-异戊醇混合物应用举例如下:

1)用于一种适用于全基因组测序的产糖被细菌基因组DNA的提取,向产糖被细菌的培养物中加入提取缓冲液和溶菌酶,37℃下静置10min,再加入蛋白酶K,65℃下静置1h;加入苯酚-氯仿-异戊醇的混合溶液,抽提;加入氯仿-异戊醇混合溶液,抽提;加入冷乙醇和醋酸钠,离心,沉淀经乙醇洗涤后室温干燥,加DNA提取缓冲液溶解;加入RNA酶,37℃下静置10min;加入PEG6000,混匀,50℃下静置10min;加入苯酚-氯仿-异戊醇的混合溶液,抽提;加入氯仿-异戊醇混合溶液,抽提;加入冷乙醇和醋酸钠溶液,离心,沉淀经乙醇洗涤后室温干燥,加ddH2O或者TE缓冲液溶解,即为提取到的DNA溶液。

2)一种从沙冬青提取高质量基因组DNA的方法,包括如下步骤:(1)植物材料液氮速冻....


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