龙胆苦苷的体外稳定性

陈国锋、高东雁、张文鑫、王建新

目的：研究龙胆苦苷（GTP）在体外生物样品中的稳定性。

方法：将龙胆苦苷溶解在不同pH的磷酸盐缓冲液、pH1.2的盐酸溶液及大鼠胃肠黏膜匀浆、胃肠道内容物、肝组织匀浆和血浆中，37℃恒温水浴，孵育-定时间后取样，高效液相色谱法测定龙胆苦苷的浓度，考察其在不同pH缓冲液和生物样品中的稳定性。

结果：37℃孵育48h后，龙胆苦苷在pH1.2的盐酸溶液、pH6.8.7.4和8.0的磷酸盐缓冲液中的降解百分率分别为2.6％、7.9％、20.2％和34.4％。龙胆苦苷在胃内容物、胃黏膜、小肠内容物、肠黏膜、肝组织匀浆中稳定，而在大肠内容物中12h降解79.8％，血浆中24h降解46.9％。

结论：GTP在偏酸性环境中较稳定，随碱性增加稳定性显著降低；GTP在胃、小肠、肝脏中稳定，而在血液和大肠中易降解。

关键词：龙胆苦苷；生物样品；稳定性

龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentiana scabra Bge.、三花龙胆Gentiana triflorapall.或坚龙胆Gentiana regescen Franeh.的干燥根及根茎，为中医常用的清肝胆实火，除下焦湿热的要药。裂环环烯醚萜苷类为龙胆中的主要活性部位，包括龙胆苦苷（Gentiopierin，GTP）、当药苦苷（Swertiamarian）、当药苷（Sweroside）、马钱子苷酸（Loganicacid）等。其中龙胆苦苷为龙胆中的主要活性成分，具有保肝、利胆、健胃、抗炎、抗菌等活性，是评价龙胆质量的主要指标成分。研究发现，小鼠GTP灌胃后，虽然吸收迅速，但生物利用度较低。

杨肖锋等对大鼠GTP灌胃后的体内代谢进行了研究，发现血清中第2天检测到龙胆碱和龙胆醛，肠内菌体外培养液中GTP含量的下降和龙胆碱与龙胆醛含量的上升呈同步变化，提示龙胆碱和龙胆醛可能是GTP体内代谢的重要生物活性产物。，影响药物口服吸收生物利用度的因素较多，如药物的解离度、脂溶性、溶出速度、膜通透性等，其中药物在胃肠道中的稳定性及首过效应对药物口服生物利用度具有显著影响。

本实验通过HPLC法测定GTP的含量，体外考察GTP在不同生理pH以及大鼠胃内容物、胃黏膜、小肠内容物、大肠内容物、肠黏膜、血浆及肝组织匀浆中的稳定性，初步揭示影响GTP稳定性的因素及其在体内的可能代谢部位，为GTP的剂型设计及合理用药提供依据。

材料和方法

试剂

甲醇（色谱纯，TEDIA）；超纯水（Millipore Simplicity@水纯化系统，USA）；GTP对照品（中国药品生物制品检定所，批号110770-200510）；龙胆苦苷原料药（本课题组自制，GTP含量为78.5％）；牛血清白蛋白（New England BiolabsInc.，英国）；其余试剂均为分析纯。

动物

SD大鼠（本校实验动物中心）....