一、糖发酵管

成分：

牛肉膏

5g

蛋白胨

10g

氯化钠

3g

磷酸氢二钠

2g

0.2%滇麝香草酚蓝溶液

12mL

蒸馏水

1000mL

PH = 7.4

制法：

葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。

其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。

注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。

试验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。迟缓反应需观察14～30d。

二、乳糖胆盐发酵管

成分：

蛋白胨

20g

猪胆盐(或牛、羊胆盐)

5g

乳糖

10g

0.04%滇甲酚紫水溶液

25mL

蒸馏水

1000mL

制法：

将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。

注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

三、5%乳糖发酵管

成分：

蛋白胨

0.2g

氯化钠

0.5g

乳糖

5g

2%溴麝香草酚蓝水溶液

1.2mL

蒸馏水

100mL

pH = 7.4

制法：

除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。

注：在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。

四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)

成分：

磷酸氢二钾

5g

多胨

7g

葡萄糖

5g

蒸馏水

1000mL

制法：

溶化后校正pH，分装试管，每管1mL，121℃高压灭菌15min。

甲基红(MR)试验：

自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性，甲基红试剂配法：10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中，然后加入20 mL蒸馏水。

V-P试验：

用琼脂培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～4d。哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL充分振摇试管，观察结果阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃下培养4h再进行观察。

五、营养明胶

成分：

蛋白胨

5g

牛肉膏

3g

明胶

120g

蒸馏水

1000mL

pH = 6.8～7.0

制法：

加热溶解，校正至pH7.4～7.6，分装小管，121℃高压灭菌10min，取出后迅速冷却，使其凝固，复查最终pH应为6.8～7.0。

试验方法：用琼脂培养物穿刺接种，放在22～25℃培养，每天观....